化学品
Chemical
MALTOSE
• 麦芽糖是由两个 D-葡萄糖分子通过 α 构型的 1,4 键连接起来的双 糖,具有还原性。
• 淀粉通过酶技术转化成麦芽糖。
• 麦芽糖磷酸本质上是结晶麦芽糖一水合物,纯度高,内毒素含量低。
• 将浓度为 0.3×106细胞/毫升的 CHO-K1 细胞重复两次接种至 DMEM/F12 无蛋白化学定义培养基(PFCDM)。
该培养基添加了 2 g/L D-(+)-葡萄糖作为补充物,或是在一次性使用的锥形瓶中添加含有 10 g/L 麦芽糖磷酸的 葡萄糖作为补充物。
• 将培养物放置在温度为 37℃、含有 8%CO2以及转速为 110rpm 的加湿培养箱中予以培养。在第 0-5 天,以及在第7 天,于此期间每天收集细胞培养上清液,同时采用 IMMAGE 800 蛋白仪,通过散射浊度测定法来测定单克隆IgG(免疫球蛋白)抗体(Her2 抗体)滴度。
• 选择浓度为 2 g/L 的葡萄糖作为基础葡萄糖浓度,确保在培养第 4 天发生葡萄糖剥夺后,出现过早发生但仍受控的细胞生长限制。
• 培养物中含有 2g/L 葡萄糖作为碳源,使得 IgG 滴度在培养第 5 天达到最大值 – 340mg/L。
• 麦芽糖磷酸补充培养物从第 5 天至第 7 天持续产生 IgG(免疫球蛋白),并达到 600mg/L。
• 根据上文所述实验步骤,对CHO-K1细胞进行接种和培养。
• 根据制造商说明,采用Vi-cell XR细胞活力分析仪(Beckman Coulter,Brea,CA)分析活细胞密度(VCD)和培养存活率。
• 在使用2g/L葡萄糖进行培养后,CHO-K1 细胞的 生长于培养第5天达到最大活细胞密度(VCD),即8.9×106细胞/mL。
• 与葡萄糖浓度仅为2g/L的培养物相比,麦芽糖磷酸补充物可实现更大的活细胞密度(VCD),即10.2×106细胞/mL,以及更长时间的培养存活率。
所有数据均由生物处理科技研究院(BTI)的 Say Kong NG博士提供。
• CHO-K1细胞可使用麦芽糖磷酸作为碳源,以便在发生葡萄糖剥夺时,用于维持培养物存活率和IgG表达。
• 与仅采用葡萄糖作为碳源的培养物相比,往已含有葡萄糖的CHO-K1细胞中添加麦芽糖磷酸补充物可增加IgG滴度。
• 与未添加麦芽糖磷酸补充物的培养物相比,麦芽糖磷酸补充物与葡萄糖的叠加使用可促进CHO-K1细胞生长。
以上结果表明,在葡萄糖之外,使用麦芽糖磷酸作为补充碳源时,可有效提高抗体表达量。
Leong DSZ等人.麦芽糖作为能量源用于无蛋白CHO-K1培养物,以提高重组单克隆抗体表达量.
Sci Rep.2018年3月6日;
8(1):4037
麦芽糖磷酸
不低于98.0%/低内毒素
25kg聚乙烯(PE)袋,
纸盒包装
JP
• 美国2类DMF认证
• Halal认证